Innovative Controls for Molecular Diagnostics: Development of Recombinant Phage-like Particles that Encapsulates Target RNA Viral Gene Segments

本研究旨在开发一种创新的分子诊断质控材料——重组类噬菌体颗粒（Phage-like Particles, PLPs），用于封装特定 RNA 病毒基因片段，以满足核酸检测中对稳定、安全、高度模拟真实样本的质控需求。研究团队基于 pZMCPLP 载体系统，在 E. coli BL21 菌株中利用 T7 启动子驱动的双表达系统，同时表达噬菌体外壳蛋白与成熟蛋白（融合 His 标签），并通过自组装形成封装目标 RNA 的类噬菌体颗粒。

生产流程包括自动诱导培养、超声裂解、核酸酶处理、亲和层析纯化（TALON 钴柱）、SDS-PAGE 与 Western Blot 鉴定、透射电子显微镜成像，以及数字滴度 PCR 定量分析。

结果表明，所制备的 MS2 类噬菌体颗粒在 2–8°C 条件下可长期稳定（实验验证至数百天），且能精准提供不同拷贝数浓度（5×10⁴、1×10⁶、1×10¹⁰ cp/mL）的 RNA 质控品。该方法不仅简化了 PLP 的生产流程，还通过融合 His 标签的成熟蛋白实现了快速、简便的纯化步骤。

这一成果为分子诊断领域提供了高稳定性、可定制化、非传染性的 RNA 质控材料，可广泛应用于新发传染病检测、实验室质量控制以及体外诊断试剂研发。